• 2022-05-26
    简述PCR技术及其基本原理。
  • 答:(1)PCR又称基因体外扩增特定序列方法。是在反应体系中加入模板DNA、dNTP、特定设计的引物及耐热的DNA聚合酶,经多次变性、退火、延伸循环反应,使目的DNA呈指数形式合成的过程。(3分)(2)基本原理:PCR扩增首先需要一对引物,根据待扩增区域两端已知序列合成两个与模板DNA互补的寡聚核苷酸引物,这一单链引物的序列将决定扩增片段特异性和长度。(2分)PCR反应体系有基因组DNA、一对引物、dNTP、TaqDNA聚合酶、酶反应缓冲体系及必需的离子强度等组成。(2分)反应在加热变性、使基因组双链DNA变性为单链后,通过降低温使特异引物与互补的DNA序列特异结合(退火或复性)后在耐热TaqDNA聚合酶作用下,以基因组单链DNA为模板,从引物端开始按5'→3'方向合成DNA(延伸)。经过变性→复性→延伸三步为一个循环,每一循环的产物作为下一个循环的模板,如此循环30次,介于两个引物之间新生DNA片段理论上达到230拷贝,约109个分子(3分)。

    内容

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      请简述PCR技术的原理

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      PCR技术的基本原理、反应体系构成及其优化,PCR优化的条件,主要应用。

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      菌种保藏的基本原理是什么?简述冷冻干燥保藏法的基本过程及其原理.

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      简述PCR基本原理。

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      PCR技术基本原理