在碱法提取质粒DNA操作过程中应注意哪些问题?
(1)提取过程应尽量保持低温;(2)提取质粒DNA 过程中除去蛋白很重要,采用酚/氯仿去除蛋白效果较单独用酚或氯仿好,要将蛋白尽量除干净需多次抽提;(3)沉淀DNA通常使用冰乙醇,在低温条件下放置时间稍长可使DNA 沉淀完全。沉淀DNA也可用异丙醇(一般使用等体积),且沉淀完全,速度快,但常把盐沉淀下来,所以多数还是用乙醇。
举一反三
内容
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在用碱裂解法少量提取质粒DNA时,质粒提取缓冲液(I液)中不包含下列哪种物质 A: 葡萄糖 B: Tris碱 C: Na2EDTA D: SDS E: 水
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提取质粒DNA时,需要注意避免染色体DNA的污染。
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碱裂解法提取质粒DNA的原理
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碱裂解法提取质粒DNA中溶液三的作用是使得 A: 质粒DNA不完全变性 B: 染色体DNA不完全变性 C: 质粒DNA复性 D: 染色体DNA复性
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简述碱裂解法提取质粒DNA的原理。