下列属于实时荧光定量PCR技术中荧光探针的设计原则的是
A: 探针要绝对保守
B: 探针的5’端不能含有G,因为即使探针被酶降解,5’端所含有的单个G碱基与FAM荧光报告基团相连时,也可以淬灭FAM基团所发出的荧光信号,从而导致假阴性的出现
C: 探针的3’端必须进行封闭完全磷酸化,避免在PCR反应过程中起引物的作用而进行延伸
D: 避免探针与引物之间形成二聚体
A: 探针要绝对保守
B: 探针的5’端不能含有G,因为即使探针被酶降解,5’端所含有的单个G碱基与FAM荧光报告基团相连时,也可以淬灭FAM基团所发出的荧光信号,从而导致假阴性的出现
C: 探针的3’端必须进行封闭完全磷酸化,避免在PCR反应过程中起引物的作用而进行延伸
D: 避免探针与引物之间形成二聚体
举一反三
- 关于TaqMan探针型荧光定量PCR说法正确的是( ) A: 切割荧光分子数与PCR产物量呈正比,可根据荧光强度计算出初始DNA量 B: 需一条与模板特异性杂交的探针,探针的3'端标记报告基团,5'端标记猝灭基团 C: 可进行多重检测 D: Taq酶将荧光基团切割下来,荧光基团与猝灭基团分离,从而发荧光
- 双杂交探针技术PCR体系中的两条荧光标记的探针中,第一条探针是探针的3’端标记___________,第二条探针的5’端标记_____________。
- 下列有关荧光定量PCR的探针说法正确的是() A: TaqMan探针利用Taq聚合酶的3‘-5’外切活性将探针酶切降解 B: SYBR荧光染料特异性地掺入到DNA双链后,发射荧光信号 C: TaqMan探针为寡核苷酸,两端分别标记有报告荧光基团 D: SYBR和TaqMan探针都属于基因特异的探针
- 荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,从而实现实时监控的。那么常用的荧光染料或荧光标记探针有哪些?( ) A: 放射性标记的寡核苷酸探针 B: TaqMan探针 C: SYBR荧光染料 D: 标记荧光的抗体
- 关于荧光定量PCR的描述,不正确的是 A: 可以定量或半定量检测PCR产物的方法 B: 荧光定量PCR主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测 C: 水解探针技术中TaqMan探针的位置位于两条引物之间 D: 荧光定量PCR在封闭状态下进行,有效避免了产物的实验室污染