• 2022-06-26
    干扰素纯化工艺过程中各工段的目的是什么?
  • ①溶解粗干扰素:配置缓冲液(超纯水,pH7.5磷酸缓冲液,0.45μm滤器和10ku超滤系统,百级层流下收集),冷却至2-10℃。在均浆器中完全溶解粗干扰素。②等点沉淀与疏水层析:磷酸调节至pH5.0,沉淀杂蛋白,离心收集上清液(含有人干扰素)。用NaOH调节上清液pH7.0,并用5M NaCl调节溶液电导值180ms/cm,上样,进行疏水层析,利用干扰素的疏水性进行吸附。在2-10℃下,用0.025M磷酸缓冲液(pH7.0)+1.6M NaCl进行洗涤,除去非疏水性蛋白。用0.01M磷酸缓冲液(pH8.0)进行洗脱,收集洗脱液,干扰素。或②等电点沉淀与盐析:磷酸调节pH4.5,调节电导值40 ms/cm,2-10℃静置过夜,除杂蛋白。1000ku超滤膜过滤,除去大蛋白。调整溶液pH8.0,10ku超滤膜,0.005M缓冲液。③阴离子交换层析与浓缩:0.01M磷酸缓冲液(pH8.0)平衡树脂,盐浓度线性梯度5~50ms/cm进行洗脱,2-10℃,配合SDS-PAGE收集干扰素峰。把目标馏分合并,调整溶液pH和电导值,10ku超滤膜,0.05M醋酸缓冲液(5.0)中透析。④阳离子交换层析与浓缩:用0.1M醋酸缓冲液(pH0.5)平衡树脂。上样,相同缓冲液冲洗。盐浓度线性梯度5-50ms/cm进行洗脱,配合SDS-PAGE收集干扰素峰。合并馏分,10ku超滤膜系统。⑤凝胶过滤层析:0.15M NaCl的0.01M磷酸缓冲液(pH7.0)清洗系统和树脂。上样,相同洗脱液进行洗脱。合并干扰素部分。⑥无菌过滤分装:0.22μm膜过滤干扰素溶液,分装,-20℃以下的冰箱中保存。

    内容

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      工艺过程又细分为若干个工段,这些工段主要是配料工段、机械加工工段、装配工段和()。

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      什么是化工过程的热量衡算?热量衡算的意义是什么?

    • 2

      化工生产过程的定义及工艺流程图是什么?

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      什么是干扰现象?干扰素的诱生剂有哪些?叙述干扰素抗病毒的机制?

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      基因工程假单胞杆菌生产重组人干扰素的分离纯化工艺主要使用了细胞破碎、离心、______ 、______ 、______ 、超滤、______ 、______ 、______ 、凝胶排阻层析等分离纯化技术。