Sanger 测序法的原理
A: 每一次DNA 测序反应都由4 个独立反应组成;
B: DNA 双链中核苷酸以3′,5′-磷酸二酯键相连,因此在测序过程中掺入2′,3′-双脱氧核苷三磷酸———ddNTP(不含3′-OH)
C: 当ddNTP 位于DNA 双链的延伸末端时, 无羟基3′端不能与其他脱氧核苷酸形成3′,5′-磷酸二酯键, 因此,DNA 双链合成便终止;
D: 若在终止位点掺入ddATP,则新生链末端为A,若掺入ddTTP、ddCTP、ddGTP,相应地,新生链末端则是U、C 或G。
A: 每一次DNA 测序反应都由4 个独立反应组成;
B: DNA 双链中核苷酸以3′,5′-磷酸二酯键相连,因此在测序过程中掺入2′,3′-双脱氧核苷三磷酸———ddNTP(不含3′-OH)
C: 当ddNTP 位于DNA 双链的延伸末端时, 无羟基3′端不能与其他脱氧核苷酸形成3′,5′-磷酸二酯键, 因此,DNA 双链合成便终止;
D: 若在终止位点掺入ddATP,则新生链末端为A,若掺入ddTTP、ddCTP、ddGTP,相应地,新生链末端则是U、C 或G。
举一反三
- 3’→5’核酸外切酶能切除()。 A: 单链DNA的5’末端核苷酸 B: 单链DNA的3’末端核苷酸 C: 双链DNA的5’末端核苷酸 D: 双链DNA的3’末端核苷酸
- 关于高通量测序第一代测序原理下面说法正确的有 A: 第一代测序也叫双脱氧法测序或Sanger测序法,它的核心技术之一就是在用DNA聚合酶合成DNA链的过程中,掺入了双脱氧核苷酸(ddNTP)。 B: Sanger法用化学合成方法合成出了3’位没有羟基的核苷酸。也就是双脱氧核苷酸ddNTP。它比单脱氧核苷酸少了一个3’位的羟基,只保留了5’位的羟基。DNA链的聚合反应也就终止,不再往下延伸了。 C: BigDye试剂的创新点就是在双脱氧核苷酸ddNTP的基础上在对应的碱基上加上荧光发光基团。 D: 有了这些发光基团做标签,在最后的识别过程中就可以通过颜色识别出末端的双脱氧核苷酸碱基是哪种碱基。
- 双脱氧链末端终止法测序反应体系中需加入dNTP和ddNTP。
- 在Sanger测序法中利用的关键原料是( )。 A: 脱氧核糖核苷酸 B: 脱氧核苷 C: 双脱氧三磷酸核苷 D: 三磷酸脱氧核苷
- T4DNA连接酶能催化下列哪种分子相邻的5'端磷酸基团与3'端羟基末端之间形成磷酸二酯键?() A: 双链DNA B: 单链DNA C: mRNA D: rRNA