试述PCR基本技术过程中引物设计的原则。
（1）引物的长度一般15～30bp；（2）引物扩增跨度：以500bp为宜，特定重要条件下可扩增长至10kb的片段；（3）引物碱基：G+C含量以40%～60%为宜，A、T、G、C最好随机分布，避免5个以上的嘌吟或嘧啶核苷酸的成串排列；（4）避免引物内部出现二级结构：避免两条引物间互补，特别是3′端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异性的扩增条物；（5）引物3′端的碱基必须与模板严格配对，而且尽量不要为A，最好选择T，因为3′端末位为T时错配几率大大降低；（6）产物有或能加上合适的酶切位点；（7）被扩增的靶序列最好有适宜的酶切点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。
举一反三
内容
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PCR引物设计需要注意
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PCR引物设计的基本要求是什么？
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PCR引物设计有哪些原则？
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PCR反应中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。
- 4
PCR技术中引物有什么作用,没它能行吗