怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoR I限制位点中去? (顺序不能颠倒)
答:(1)化学合成一些含有EcoRI识别位点的短的DNA片段,(2)与待克隆片段两端连接起来,(3)用EcoRI切割连接片段,(4)产生EcoRI的单链末端。(5)插入到EcoRI的限制性内切酶位点中。
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举一反三
内容
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常用的平末端DNA片段连接法有______、______和______等。
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不属于目的基因与运载体结合过程的是( ) A: 将重组DNA导入到受体细胞进行扩增 B: 用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端 C: 用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端 D: 将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处
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以下哪种DNA 聚合酶具有末端转移酶的活性,可在 DNA 片段的 3’末端添加一个核苷酸A。( ) A: 大肠杆菌DNA聚合酶I B: Klenow DNA聚合酶 C: Pfu DNA聚合酶 D: Taq DNA聚合酶
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E.Coli DNA连接酶既能连接双链DNA互补的黏性末端,同时也能连接两个具有平末端的DNA片段。
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一含N个元素的顺序表,若在第i个元素之前插入一个元素,需移动____个元素。