简述利用蓝白斑筛选重组子的原理。
β—半乳糖苷酶基因编码1021个氨基酸,基因产物装配为四聚体后才有酶活性。该蛋白质可分为两部分:α肽段和β肽段。前者负责四聚体装配,后者具β—半乳糖苷酶活性;只有当两者都存在时,才会表现出酶活性,可催化X-Gal水解为兰色产物,该作用称之为α-互补作用。这两个部分可独立存在,分别由两个基因编码。为α肽段编码的基因称之为lacZα(编码145AAs),lacZα编码区5‘-端可容许很大的变化(如加入多克隆位点)而不影响酶活性。当外源DNA分子插入多克隆位点后,会破坏α肽段的编码。所以重组DNA转化α肽段编码区缺失的E.coli,涂布在含X-Gal的平板上会产生白色菌落,而非重组子产生蓝色菌落。
内容
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蓝白斑筛选中长出的白斑有可能不是目的重组子。(<br/>)
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蓝-白斑筛选平板上,蓝斑为重组子,白斑仅含空载体。( )
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简单说明DNA重组技术中的蓝白斑筛选原理。
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蓝白斑筛选过程中的插入外源片断的重组子呈蓝色。
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用蓝白斑筛选重组子时,IPTG的作用是:()