中国大学MOOC: 大肠杆菌表达时不存在信号肽,所以表达的蛋白质是胞内产物, 要经过细胞破碎才能分离出目的蛋白. 生成的蛋白质常形成不溶性的包含体, 要经过复性才能恢复其生物活性.
举一反三
- 大肠杆菌表达时不存在信号肽,所以表达的蛋白质是胞内产物, 要经过细胞破碎才能分离出目的蛋白. 生成的蛋白质常形成不溶性的包含体, 要经过复性才能恢复其生物活性. A: 正确 B: 错误
- 大肠杆菌在表达外源蛋白时常由于无信号肽，表达为胞内产物, 要经过细胞破碎才能分离出目的蛋白，生成的蛋白质常形成不溶性的包含体, 要经过复性才能恢复其生物活性。
- 以下对重组蛋白的描述错误的是(<br/>) A: 大肠杆菌表达的重组蛋白和动物细胞表达的重组蛋白没有明显区别 B: 存在可溶性蛋白质和不溶性蛋白质两种 C: 不溶性蛋白质以包含体的形式存在于细胞质中,分离难度大 D: 大肠杆菌表达系统会产生内毒素
- 大肠杆菌蛋白质表达系统表达的蛋白都能正确折叠，表达的蛋白活性较高。
- 解决包含体蛋白质复性率低的问题，一方面可以从上游水平进行解决，通过促进重组蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达，改变大肠杆菌的生长条件，使重组蛋白与其它蛋自融合表达或共表达，或使重组蛋白分泌表达至细菌周质等策略，使重组蛋白在大肠杆菌中表达成可溶的活性形式，另一方面则需要从生物工程下游技术角度去解决这一问题，优化复性过程，将包含体蛋白在体外复性得到生物活性蛋白。