什么是基因工程菌,工程菌构建的基本过程和各阶段的主要任务是什么,所涉及基因工程原理是什么?
将目的基因导入细菌体内使其表达,产生所需要的蛋白的细菌称为基因工程菌。工程菌构建的基本过程如下:目标基因克隆(PCR、文库筛选、化学合成)→表达载体构建(酶切、链接)→遗传转化与筛选(外源基因导入与培养)→工程菌(获得新形状、功能、产生物质)酶切:在特异位点上催化双链DNA分子的断裂,产生相应的限制性片段。(DNA+缓冲液+限制性内切酶;37℃,1小时;加热、加EDTA终止;电泳检查酶切完整性)链接:DNA双链上相邻的3’羟基和5’磷酸基团共价结合形成3’-5’磷酸二酯键,使原来断开的DNA缺口重新连接起来。(载体片段和基因片段,缓冲液,连接酶;16-26℃,数小时;70℃加热10min终止反应)转化:把外源基因导入宿主细胞的过程。(氯化钙法向大肠杆菌导入外源基因)
举一反三
内容
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下列哪些属于基因工程制药过程的上游技术 A: 基因工程药物的分离纯化 B: 工程菌或工程细胞的培养 C: 目的基因的获得 D: 工程菌或工程细胞的构建
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基因工程药物生产的主要程序是不包括以下那个方面? A: 目的基因的克隆。 B: 药物的药理、药效研究。 C: 将DNA重组体转入宿主菌构建工程菌。 D: 工程菌的发酵;外源基因表达产物的分离纯化。
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基因工程药物生产的主要程序包括以下那个方面? A: 目的基因的克隆 B: 将DNA重组体转入宿主菌构建工程菌。 C: 药物的药理、药效研究。 D: 工程菌的发酵;外源基因表达产物的分离纯化。
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基因工程药物生产的下游阶段包括( ) A: 分离目的基因 B: 构建工程菌(细胞)及其大规模培养 C: 构建工程菌(细胞) D: 工程菌(细胞)的大规模培养一直到产品的分离纯化、质量控制等
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基因工程的基本技术是( )。 A: 引入外源基因 B: 拼接外源基因 C: 调控基因表达 D: 培养基因工程菌