基因重组过程中,外源基因与载体有哪些主要连接方式?
基因重组过程中,外源基因与载体主要连接方式包括:(1)粘性末端连接:用同一种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体,可产生完全相同的粘性末端,然后在DNA连接酶的催化作用下形成共价结合的重组DNA分子。如果两种不同的限制性核酸内切酶切割后产生配伍末端也可以进行连接(2)平末端连接:某些限制性核酸内切酶切割DNA后产生平末端,也可在DNA连接酶的作用下进行连接,且不管末端序列如何。(3)同聚物加尾连接:载体和外源DNA可在末端转移酶的作用下加上同聚物序列如,多聚A和多聚T,制造出粘性末端,通过A和T之间的退火进行连接(4)人工结构连接:对平末端DNA或载体DNA,可在连接前将磷酸化的接头或适当分子连接到平末端,使其产生新的限制性核酸内切酶的位点,再经限制酶切割后产生新的粘性末端进行连接。
举一反三
内容
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外源基因表达的基本流程是()。 ①重组表达载体导入宿主细胞; ②目的基因的获得; ③重组表达载体的筛选与认; ④目的基因与载体的重组; ⑤目的基因的表达。 A: ②④①③⑤ B: ①②④③⑤ C: ②④③①⑤ D: ④②①③⑤
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外源基因表达的基本流程是()。 ①重组表达载体导入宿主细胞; ②目的基因的获得; ③重组表达载体的筛选与认; ④目的基因与载体的重组; ⑤目的基因的表达。 A: A②④①③⑤ B: B①②④③⑤ C: C②④③①⑤ D: D④②①③⑤
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克隆目的基因的过程不包括: () A: 目的基因获取 B: 表达目的基因编码的蛋白质 C: 外源基因与载体的连接 D: 重组DNA分子导入受体细胞 E: 筛选并无性繁殖含重组DNA分子的受体细胞
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以下哪一项不属于DNA重组技术的主要步骤?() A: 蛋白的纯化 B: 目的基因的获取 C: 外源基因与载体的连接 D: 重组DNA转化进入宿主细菌
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外源基因表达的基本流程是()1重组表达载体导入宿主细胞2目的基因的获得3重组表达载体的筛选与确认4目的基因与载体的重组5目的基因的表达 A: ②④①③⑤ B: ①②④③⑤ C: ②④③①⑤ D: ④②①③⑤