P.CR是在试管中进行的DNA复制反应，是以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5`端和3`端互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶作用下，按半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，反复重复这一过程，可使目的DNA片段得到扩增。参与PCR反应体系的因素：①模板核酸；②引物；③缓冲液④TagDNA聚合酶；⑤Mg2＋；⑥dNTP；⑦反应温度与循环次数；⑧PCR仪等。应用：①目的基因克隆，②基因体外突变，③DNA微量分析④mRNA含量分析。可应用于遗传病的基因诊断；肿瘤的诊断、转移确定；组织器官移植的配型选择等等。优化条件：①Mg2+－降低浓度阻止非特异和不想要的PCR产物。增加浓度赢得更多的产量。EDTA螯合Mg2+，因而可以改变Mg2+的浓度。②DNA模板浓度－为了减少TaqDNA聚合酶的产生错误的可能性，使用更高浓度的DNA。但是使用太多可能增加污染物的量，降低反应效率。③聚合酶－与Pfx相比较，TaqDNA聚合酶具有更高的错配率（没有可以进行校正的3’到5’外切酶活性）。如果需要高保真度，可以使用Pfx。Taq酶倾向在3’末端增加非模板的A.为了提高效率，可以额外增加酶的量（由于Taq酶可能在重复的循环中损耗），然而这可能增加非特异的PCR产物.④dNTP－可以使用高达1.5mMdNTP。dNTP螯合Mg。过高dNTP可能增加错配率。降低dNTP的浓度（10-50μM）可以减少错配率。大PCR片段比小的片段要求更多的dNTP。⑤引物－可以使用高达3μM的引物。高引物模板比可能导致非特异扩增和引物二聚体的形成。小批量分装储存引物，以避免多次反复冻融。⑥热循环－如果模板GC含量高，增加变性的时间。对于较大的PCR片段应该增加延伸的时间，但是这可能会对酶造成损害。如果模板DNA的量非常低，增加循环的次数，如果模板DNA的量大，减少循环次数。⑦PCR缓冲液－更高浓度的缓冲液可以用来提高反应的效率。