根据批准上市的重组蛋白质药物出发,比较分析工程大肠杆菌、酿酒酵母和动物细胞表达系统制药的优缺点,指出在制药产生中如何选择合适的表达系统?
答:大肠杆菌表达系统:优点(1)遗传背景清除,目标表达水平高;(2)培养周期短,抗污染能力强;(3)操作简单,方法成熟。缺点(1)无亚细胞器,表达产物缺乏翻译后修饰,如糖基化、酰胺化等;(2)含有内毒素,难以清除,产生热源;(3)N端增加的蛋氨酸容易引起免疫反应。酿酒酵母表达系统:优点(1)无毒、安全;(2)培养条件简单,大规模培养技术成熟;(3)具有亚细胞器,能进行蛋白质的翻译后修饰和加工,并具有良好的蛋白质分泌能力。缺点:(1)产生乙醇,制约了高密度发酵;(2)修饰的蛋白质糖基化侧脸有时过长,引起副作用。动物细胞表达系统:优点(1)具有完善的翻译后修饰功能,能进行蛋白质的正确加工、修饰并装配折叠成具有生物活性的功能分子,产品接近或类似天然产物;(2)分泌到培养基中,分离纯化相对简单。缺点:(1)培养条件要求严格、苛刻,对生长环境十分敏感;(2)细胞生长缓慢,生产效率较低,成本高。根据以上特点,针对需要糖基化的药物,最好用动物细胞表达系统,蛋白质类药物大多采用动物细胞表达系统。对于无需蛋白质修饰及加工药物,可优先选用大肠杆菌表达系统。
举一反三
- 生物技术制药常用的表达系统有 A: E.coli表达系统 B: 病毒表达系统 C: 酵母表达系统 D: 哺乳动物细胞表达系统
- 以下对重组蛋白的描述错误的是(<br/>) A: 大肠杆菌表达的重组蛋白和动物细胞表达的重组蛋白没有明显区别 B: 存在可溶性蛋白质和不溶性蛋白质两种 C: 不溶性蛋白质以包含体的形式存在于细胞质中,分离难度大 D: 大肠杆菌表达系统会产生内毒素
- 近5年来,美国和欧盟新批准的基因重组生物技术药物中,主流的表达系统是(),占到近65%。 A: CHO细胞 B: 酿酒酵母 C: 汉逊酵母 D: 大肠杆菌
- 蛋白质常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、杆状病毒和哺乳动物细胞
- 酿酒酵母表达系统的优缺点?
内容
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目标蛋白在下列()宿主系统表达成本最高。 A: 大肠杆菌 B: 酵母 C: 枯草芽孢杆菌 D: 哺乳动物细胞
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目标蛋白在下列()宿主系统表达成本最高 A: 大肠杆菌 B: 酵母 C: 昆虫细胞 D: 哺乳动物细胞
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下面表达系统为原核表达系统的是()。 A: 大肠杆菌 B: 毕赤酵母 C: 昆虫细胞 D: 动物细胞
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细胞生长最快、表达水平最高的表达系统是 A: 酵母 B: 大肠杆菌 C: 植物细胞 D: 哺乳动物细胞
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目前,多用——表达系统,表达重组胰岛素 A: 大肠杆菌 B: 酵母