分别收集EGF刺激0分钟、5分钟、10分钟和30分钟的184Al乳腺癌细胞,提取蛋白质,分别进行酶解,然后采用iTRAQ试剂中的114Da、ll5Da、116Da和117Da不同核素标记。将它们等量混合,采用抗泛酪氨酸磷酸化抗体进行免疫沉淀,再经过固相金属亲和层析(lmmobilized metal affinity chromatography,IMAC)进一步纯化,最后用LC-MS/MS鉴定与定量分析获得不同iTRAQ标记的、混合的酪氨酸磷酸化肽段,并确定酪氨酸磷酸化位点。通过上述研究、可以发现
A: iTRAQ只能相对定量,就像上述研究中通过不同实验组的比较才能获得酪氨酸磷酸化的比例
B: 因为基于抗体免疫沉淀,所以不可能发现新的参与该过程的酪氨酸磷酸化蛋白质
C: 对磷酸化肽段肯定能鉴定分析出来,但对去磷酸化就无能为力了
D: 依据不同蛋白质磷酸化出现的先后顺序,可以建立它们之间的上下游关系,从而动态地了解EGFR信号通路的转导过程
E: 生物信息学分析在整个研究过程中用不上
A: iTRAQ只能相对定量,就像上述研究中通过不同实验组的比较才能获得酪氨酸磷酸化的比例
B: 因为基于抗体免疫沉淀,所以不可能发现新的参与该过程的酪氨酸磷酸化蛋白质
C: 对磷酸化肽段肯定能鉴定分析出来,但对去磷酸化就无能为力了
D: 依据不同蛋白质磷酸化出现的先后顺序,可以建立它们之间的上下游关系,从而动态地了解EGFR信号通路的转导过程
E: 生物信息学分析在整个研究过程中用不上
举一反三
- 动物体内高能磷酸化合物的生成方式有氧化磷酸化、底物水平磷酸化和光合磷酸化。
- 蛋白质中容易发生磷酸化与去磷酸化的是[br][/br] A: 酪氨酸、缴氨酸、甘氨酸 B: 苯丙氨酸、苏氨酸、须氨酸 C: 丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸 D: 甘氨酸、丝氨酸、缴氨酸 E: 丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸
- 癌基因表达的酪氨酸蛋白激酶主要是催化() A: 受其作用的酶蛋白酪氨酸残基磷酸化 B: 蛋白质丝氨酸磷酸化 C: 蛋白质苏氨酸磷酸化 D: 组蛋白磷酸化 E: 任一氨基酸磷酸化
- 酸化按酸液来分可分为()。 A: 盐酸酸化、土酸酸化、磷酸酸化、氢氟酸酸化、醋酸酸化 B: 盐酸酸化、土酸酸化、乙酸酸化、甲酸酸化、醋酸酸化 C: 盐酸酸化、土酸酸化、甲酸酸化、氢氟酸酸化、醋酸酸化 D: 甲酸酸化、土酸酸化、磷酸酸化、氢氟酸酸化、醋酸酸化
- 蛋白质磷酸化时,需要__________酶,而蛋白质去磷酸化需要____________酶