膜上多处出现黑斑或黑点,可能原因是( )。
A: 洗膜过度
B: 一抗浓度过高
C: 二抗浓度过高
D: 抗体与封闭液非特异性结合
A: 洗膜过度
B: 一抗浓度过高
C: 二抗浓度过高
D: 抗体与封闭液非特异性结合
举一反三
- 中国大学MOOC: 膜上多处出现黑斑或黑点,可能原因是( )。
- 以下关于Western Blot实验流程中封闭和抗体杂交的描述中,正确的是:( ) A: 一抗孵育时,目标蛋白即为一抗的抗原。 B: 选择合适的一抗及二抗浓度,浓度高不一定效果好,过高会导致过高背景。 C: 为了避免一抗/二抗与膜的非特异性结合,因此要对杂交膜进行长时间的封闭。 D: 产生一抗和二抗的物种一般是相同的。
- 膜的背景很脏,可用( )方法避免。 A: 适当调整一抗浓度 B: 适当调整二抗浓度 C: 增加膜的洗涤次数 D: 延长封闭时间,更换封闭液
- Western 图片上目的条带异常发白,周围有背景,原因是( ) A: 一抗浓度过低 B: 二抗浓度过低 C: 未加二抗 D: 一抗浓度过高
- 孵育一抗前,封闭PVDF膜的主要目的是( ) A: 使更好的抗体填入 B: 增强非特异性结合位点的信号 C: 增强特异性结合位点的信号 D: PVDF膜上有很多非特异性结合位点,需要被蛋白填上,避免抗体的非特异性结合