以下关于Western Blot实验流程中封闭和抗体杂交的描述中,正确的是:( )
A: 一抗孵育时,目标蛋白即为一抗的抗原。
B: 选择合适的一抗及二抗浓度,浓度高不一定效果好,过高会导致过高背景。
C: 为了避免一抗/二抗与膜的非特异性结合,因此要对杂交膜进行长时间的封闭。
D: 产生一抗和二抗的物种一般是相同的。
A: 一抗孵育时,目标蛋白即为一抗的抗原。
B: 选择合适的一抗及二抗浓度,浓度高不一定效果好,过高会导致过高背景。
C: 为了避免一抗/二抗与膜的非特异性结合,因此要对杂交膜进行长时间的封闭。
D: 产生一抗和二抗的物种一般是相同的。
举一反三
- 题目:Western<br/>blot基本步骤为(<br/>)<br/>选项: A: 电泳→转膜→一抗→封闭→二抗→显色 B: 电泳→转膜→一抗→二抗→封闭→显色 C: 电泳→转膜→封闭→一抗→二抗→显色 D: 转膜→电泳→封闭→一抗→二抗→显色 E: 转膜→封闭→电泳→一抗→二抗→显色
- Western 图片上目的条带异常发白,周围有背景,原因是( ) A: 一抗浓度过低 B: 二抗浓度过低 C: 未加二抗 D: 一抗浓度过高
- 膜上多处出现黑斑或黑点,可能原因是( )。 A: 洗膜过度 B: 一抗浓度过高 C: 二抗浓度过高 D: 抗体与封闭液非特异性结合
- 在蛋白质杂交过程中,一抗通常选用特异性的单克隆抗体,二抗常用针对一抗的多克隆抗体。( )
- 膜的背景很脏,可用( )方法避免。 A: 适当调整一抗浓度 B: 适当调整二抗浓度 C: 增加膜的洗涤次数 D: 延长封闭时间,更换封闭液